GF-677 hibrit (Prunus amygdalus X P. persica) anacının in vitro rejenerasyonu ve mikro çoğaltımı

Abstract

Bu çalışmada, bademe anaç olarak kullanılan GF-677 hibrit (P. amygdalus x P. persica) anacının in vitro rejenerasyon protokolü oluşturulmuştur. Boğum eksplantları farklı konsantrasyonlarda (0.5-2.0 mg/l) BA (benziladenin) içeren MS (Murashige ve Skoog, 1962) besin ortamında kültüre alınmışlardır. 1 mg/l BA içeren MS besin ortamında kültüre alınan boğum eksplantlarında yüksek oranda sürgün oluşumu ve kardeşlenme sağlanmıştır. İn vitro sürgünlerin genç yaprakları alınarak, farklı konsantrasyonlarda TDZ (thidiazuron) veya BA içeren MS ya da TDZ ve BA’nın NAA (naftalen asetik asid) ile farklı konsantrasyonlardaki kombinasyonlarını içeren MS besin ortamında kültüre alınmışlardır. Yaprak eksplantları üç hafta karanlık periyottan sonra 16 saat fotoperiyoda tabii tutulmuştur. Üç haftalık karanlık uygulaması süresince yaprak eksplantlarının kesik yüzeylerinde kallus oluşumu başlamıştır. Yaprak eksplantları üç hafta aralıklarla taze besin ortamında altkültüre alınmıştır. 1 mg/l BA içeren MS ortamında kültüre alınan in vitro sürgünlerin dip kısımlarında beyaz renkli yoğun bir kallus oluşumu başlamıştır. Sürgün diplerindeki kallus dokularından rejenere olan adventif sürgünler boylarının uzatılması amacıyla 0.0, 0.1 veya 0.5 mg/l BA içeren MS besin ortamında kültüre alınmıştır. Sürgün boyunun uzaması için en etkili kültür ortamının 0.5 mg/l BA, 30 g/l sukroz ve 5.5 g/l agar içeren MS besin ortamı olduğu belirlenmiştir. Boyları uzayan sürgünler köklendirilmek amacıyla 0.05-2.0 mg/l IBA içeren ½ MS besin ortamında kültüre alınmıştır. 1 mg/l IBA içeren ½ MS besin ortamında %84.2 oranında köklenme elde edilirken, köklü bitkiciklerin %66.4’ü dış koşullara alıştırılabilmiştir.