HİPOKSİK KOŞULLARDA UYGULANAN NARİNGENİNİN VOLTAJ KAPILI SODYUM KANALI ARACILI KANSER HÜCRE HAREKETİ ÜZERİNDEKİ ETKİSİ

Abstract

Hipoksi normal koşullara göre daha az oksijen seviyelerini ifade eder. Tümörlerde hacim arttıkça mikroçevresinde oksijen azlığı ortaya çıkmaya başlar. Aynı zamanda damarlanmanın yetersiz olması ve tümörün bazı bölgelerinin kan damarına uzak yerleşimi nedeniyle hipoksik koşullar ortaya çıkar. Tümör hücreleri de sağ kalımı sürdürebilmek için bu koşullara adapte olur. Hipoksiyle indüklenebilir faktör (HIF) aracılığıyla hücre sağ kalımını, anjiyogenezi, apoptozu, invazyon ve metastazları kendi lehine destekleyecek genlerin ekspresyonunu indükler. Hipoksinin, metastatik süreçte rol oynayan matriks metalloproteinazlar ve katepsinleri aktive etmenin yanı sıra voltaj kapılı sodyum kanalı (VGSC) aracılı hücre hareketi ve invazyonu da desteklediğine dair bulgular mevcuttur. Son yıllarda yapılan çalışmalar ile VGSC’lerin prostat, meme, akciğer, kolon vb birçok kanser hücresinde metastatik hücre davranışları ile ilişkili olduğuna dair bulgular artmaktadır. Bu çalışmanın amacı, yüksek metastatik özelliğe sahip ve metastatik yeteneği VGSC’ler ile ilişkili olan PC-3 prostat kanseri hücrelerinin hareketi üzerinde, naringenin doğal bileşiğinin, normoksik ve hipoksik koşullarda oluşturacağı etkileri araştırmaktır. Bunun için öncelikle hücre proliferasyonunu etkilemeyen bileşik konsantrasyonu Alamar blue kullanılarak belirlendi. Daha sonra yara kapanma analizi yapılarak bu konsantrasyondaki naringeninin hücrelerin yanal yöndeki hareketi üzerindeki etkisi tespit edildi. Ayrıca bileşik uygulamasından sonra hücre içi sıvıdaki sodyum iyon konsantrasyonları indüktif eşleşmiş plazma spektroskopisi (ICP) yöntemi ile ölçüldü. Naringeninin hücre proliferasyonunu etkilemeyen konsantrasyonları 75 ve 100 µM olarak tespit edildi. Bu konsantrasyonlarda naringeninin her iki koşulda hücrelerin hareketini etkilemediği görüldü. ICP analizi sonuçlarına göre naringenin uygulanan grupta, normoksik koşulda hücre içi sodyum iyon konsantrasyonu kontrol grubuna (59.5mM) göre azalırken (NAR75: 47.8mM; NAR100: 54.8mM), hipokside arttığı (K: 47.7mM; NAR75: 51.6mM; NAR100: 61.9mM) dikkat çekmiştir. Tüm sonuçlar birlikte değerlendirildiğinde naringeninin insan prostat kanseri PC-3 hücrelerinin hareketini normokside etkilemezken hipoksik koşulda arttırabileceği tespit edilmiştir. Bu nedenle naringeninin özellikle kanser hastaları tarafından kullanımı konusunda dikkatli olunması gerektiğini vurgulamak istiyoruz.