DETERMINATION OF miR-155-5p EXPRESSION LEVEL IN EHRLICH ASCITES TUMOR-BEARING MICE TREATED WITH OLIVE LEAVES

Abstract

Meme kanseri, dünya çapında kadınlarda kanser ölümlerinin ilk nedenidir. miRNA'ların kanser gelişiminde önemli bir rol oynadığı gösterilmiştir. Bu nedenle miRNA'ların transkripsiyonunu modüle etmek için doğadan kaynaklanan ajanların kullanılması umut vericidir. Zeytin yaprağı çayı (OLT) faydalı özelliklere sahiptir ve insanlar tarafından iyi tolere edilir. Bu çalışma, bir meme kanseri modeli olan Ehrlich ascites tümör taşıyan farelere OLT tedavisinin, farelerin karaciğerindeki miR-155-5p ekspresyonu üzerindeki etkisini belirlemek için yapılmıştır. Elli dört fare deneylerde kullanıldı. Fareler sekiz gruba ayrıldı. Bu grupların beşindeki hayvanlara intraperitoneal olarak 3×105 Ehrlich ascites tümör (EAT) hücreleri enjekte edildi. Bir grup tedavi edilmedi (tedavi edilmeyen kontrol, n=7). İkinci grupta [Tümör büyümesi: OLT(6 gün), n=7], farelere ikinci günden yedinci güne kadar ağızdan OLT verildi. Üçüncü grupta [Tümör büyümesi: 5-FU(tek doz), n=7], farelere ikinci gün intraperitoneal olarak tek doz 5-florourasil (5-FU) enjekte edildi. Dördüncü grupta [Tümör büyümesi: OLT(6 gün) + 5-FU(tek doz), n=7], farelere iki ila yedinci gün arasında oral olarak OLT ve ikinci gün intraperitoneal olarak tek doz 5-FU uygulandı. Beşinci grupta (Tümör başlangıcı, n=7) OLT uygulamasına EAT enjeksiyonu ile aynı gün başlandı ve sekiz gün devam edildi. Altıncı grupta (Koruyucu etki, n=7) hayvanlara on beş gün süreyle ağızdan OLT verildi. 7. günde, fare peritonuna EAT hücre enjeksiyonu yapıldı. Yedinci grupta (BSS kontrol, n=8) farelere sıfırıncı günde periton içine dengeli tuz çözeltisi (BSS) enjekte edildi. Bu hayvanlar, OLT'yi ya sıfırdan yediye ya da sıfırdan on dört güne kadar ağızdan aldılar. Son grupta (sahte kontrol, n=4) herhangi bir uygulama yapılmadı. Deneylerin sonunda, fareler anestezi koşulları altında sakrifiye edildi. Fareler dissekte edildi, karaciğer dokuları toplandı ve RNA koruyucu çözelti (RNA-later-solution) ilave edilerek sıvı nitrojen içinde saklandı. OLT'nin karaciğerde miR-155-5p ekspresyonu üzerindeki etkisi qRT-PCR ile değerlendirildi. Çalışmamızda miR-155-5p'nin tümör büyümesi ve tümör başlangıcı üzerindeki etkilerini incelediğimiz gruplarda 6 ve 8 günlük OLT uygulamasının ardından miR-155-5p ekspresyon düzeyinde anlamlı bir değişiklik gözlenmedi. Ancak tümör oluşumundan önce başlamak üzere toplam 15 gün boyunca OLT uygulanması sonucunda miR155-5p ekspresyonunun tedavi edilmeyen gruba göre 14.34 kat arttığını gösterdik. Tüm bulguları birlikte değerlendirdiğimizde OLT'nin karaciğeri hücresel hasar veya tümör oluşumundan koruyabileceğini düşünüyoruz.